技術(shù)概況：控制農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一就是要利用蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)，對農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量及時、準(zhǔn)確的分析檢測，將對政府部門決策提供科學(xué)依據(jù)。目前廣泛使用農(nóng)藥殘留檢測方法主要有色譜檢測法和速側(cè)儀法。速測儀法因其成本低、快速、簡便、能夠檢測大批量樣本、對于檢測人員的技術(shù)水平要求不高以及適宜推廣于基層技術(shù)人員等特點(diǎn)。成為國內(nèi)應(yīng)用為廣泛的農(nóng)藥殘留快速檢測方法，主要用于蔬菜、水果生產(chǎn)基地和批發(fā)市場中產(chǎn)品有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留超標(biāo)情況的快速檢測。

技術(shù)要點(diǎn)：

1、儀器設(shè)備：RP-410型農(nóng)藥殘留速測儀

2、試劑及準(zhǔn)備

（1）緩沖液：取一包一定比例的磷酸氫二鈉+磷酸二氫鉀，加1000毫升蒸餾水溶解，調(diào)pH至8。

（2）酶：加3毫升緩沖液，放入冰塊，保持低溫，維持酶活性。

（3）顯色劑：加10毫升緩沖液溶解備用。

（4）底物：加10毫升緩沖液溶解備用。

3、樣品前處理方法

（1）取樣：選取表面干凈的待檢蔬菜，葉菜類用取樣器隨機(jī)取不同植株的葉片，果瓜菜類用取樣器沿皮取約1厘米的樣品。葉菜類取材2克，非葉菜類取4克。

（2）提�。簩⑺∈卟藰悠非兴榉湃胩崛∑恐�，加入20毫升提取試劑，震蕩１~2分鐘，倒出上清液，靜置3~5分鐘，即為樣品提取液。倒出上清液時，倒入口徑較小的試管中，這樣便于下一步移液操作。往試管里倒上清液時，尤其是葉菜類樣品，要格外小心，盡量不要把碎葉片倒出，否則，將堵塞移液槍的管嘴，處理時相當(dāng)困難。

（3）培養(yǎng)：取5只平底小試管，1支為空白對照，依次加入50μL酶，3毫升提取試劑，50微升L顯色劑；其他4支為樣品，分別依次加入50微升酶，3毫升樣品提取試液，50μL顯色劑，在37~38℃下培養(yǎng)30分鐘。首先，要注意保持酶、提取試劑（樣品提取液）、顯色劑時間上的一致性，要迅速地將樣品分別加入5支平底小試管中，然后將50微升酶和3毫升提取試劑分別加入5支平底小試管中，將顯色劑分別加入5支平底小試管中；其次，培養(yǎng)溫度要嚴(yán)格控制在37℃-38℃之間，培養(yǎng)過程中溫度發(fā)生變化，超出范圍，直接影響測定結(jié)果，溫度低于37℃，抑制率偏低，溫度高于38℃，抑制率偏高。培養(yǎng)時間要嚴(yán)格控制為30分鐘，時間少于30分鐘，抑制率偏低，時間多于30分鐘，抑制率偏高。

（4）結(jié)果檢測與分析

將培養(yǎng)后的5支平底小試管內(nèi)分別加入50微升底物，然后迅速倒入比色杯內(nèi)，放入RP-410中進(jìn)行檢測，如動作緩慢將會導(dǎo)致抑制率偏高。空白試管對應(yīng)的比色杯要放在儀器的外一格中，否則，檢測結(jié)果無效。比色杯放入后，要按空白鍵，若按了樣品鍵，檢測結(jié)果亦無效。RP-410每次可檢測5個樣品，若檢測多個樣品時，可繼續(xù)檢測，不必再設(shè)空白對照，5個樣品為一組。

檢測完畢，儀器將自動打印出檢測結(jié)果，即每個樣品的抑制率。抑制率<70%，樣品合格；抑制率≥70%，樣品不合格。若抑制率≥70%的樣品，蔬菜中可能含有某種有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留，此時樣品要有兩次以上重復(fù)試驗(yàn)，幾次重復(fù)檢測的重現(xiàn)性應(yīng)在80%以上，才能判定此樣品是否合格。抑制率在-10%~70%之間，均屬正常，一旦抑制率超出此范圍，則表示操作失誤，需重新檢測。

注意事項(xiàng)：

1、該方法適用于新鮮蔬菜和水果上的農(nóng)殘留快速檢測，但部分含特殊物質(zhì)的蔬菜如大蔥、大蒜、韭菜等以及一些菌類如蘑菇等，易得出現(xiàn)假陽性結(jié)果。對含殘留量愈高的蔬菜，測定的誤差愈大。不適合用茶葉等干性物質(zhì)的樣品的檢測。

2、該方法只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，不適用于其他農(nóng)藥殘留檢測，且只能定性。所以，當(dāng)用此方法檢測有殘留問題的蔬菜時，如果要作為仲裁處理，應(yīng)送到有關(guān)部門進(jìn)一步用氣相色譜等儀器進(jìn)行定性和定量分析，其結(jié)果方可作為終結(jié)論性數(shù)據(jù)。

3、在有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中，也有少部分農(nóng)藥品種對此方法不夠靈敏（檢出濃度大于30mg/kg）。此酶對以下農(nóng)藥不敏感：甲基對硫磷、水胺硫磷、甲基異柳磷、毒死蜱、樂果等。

適宜區(qū)域：本方法適用于除蔥姜、蘿卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇等以外的葉菜類、果菜類、豆類、瓜菜類蔬菜中，有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的定性檢測。